Technique Fluorescence-anticorps pour la détection d’une bactérie particulière dans un échantillon

Technique Fluorescence-anticorps pour la détection d'une bactérie particulière dans un échantillon

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Pour but d’apprendre le principe de l’immunofluorescence ou la fluorescence-anticorps technique pour la détection de bactéries particulières dans un échantillon.

La fluorescence d’anticorps ou d’une technique d’immunofluorescence est un procédé rapide et fiable pour la détection de bactéries dans un échantillon particulier. Un certain nombre d’anticorps, marqués avec des colorants fluorescents, tels que l’isocyanate ou l’isothiocyanate de fluorescéine, chaque produit spécifique aux bactéries particulières sont disponibles.

L’un de ces anticorps marqués, spécifiques aux bactéries particulières à détecter, on ajoute goutte à goutte à un frottis de chaleur fixe de l’échantillon inconnu de bactéries sur un toboggan et écartez doucement sur la surface du frottis. Un papier filtre imprégné est placé dans une boîte de pétri.

Ensuite, la lame est placée à l’intérieur d’une tige de verre en forme de U et mis à incuber à 25 ° C pendant 35 minutes. L’excès d’anticorps sur le frottis est lavé avec 1% de solution saline tamponnée au phosphate. La lame est immergée dans une jarre de Coplin contenant 1% de tampon phosphate salin à 25 ° C pendant 10 minutes. La lame est séchée par du papier absorbant. On ajoute une goutte de glycérol est ajouté au frottis. Il est recouvert d’une lamelle et examiné sous un microscope à fluorescence.

Si les bactéries spécifiques à l’anticorps marqué utilisé est présent dans l’échantillon inconnu de bactéries, d’un complexe antigène-anticorps est formé (en l’occurrence des bactéries est l’antigène). Que l’anticorps est marqué avec une substance fluorescente, le complexe antigène-anticorps émet de la fluorescence, quand on l’observe sous un microscope à fluorescence. Si des bactéries spécifiques à l’anticorps est absent, l’immunofluorescence est éliminé par lavage et la fluorescence est pas observée.

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