utilisation Principe du test, de la procédure, les résultats attendus et les organismes Citrate positifs

utilisation Principe du test, de la procédure, les résultats attendus et les organismes Citrate positifs

test d’utilisation du citrate est couramment employé dans le cadre d’un groupe de tests, le IMViC (indole, le rouge de méthyle, VP et Citrate) tests, qui distinguent entre les membres de la famille des entérobactéries en fonction de leur sous-produits métaboliques. Utilisation du citrate peut être utilisé pour distinguer entre les coliformes tels que Enterobacter aerogenes (+ ve) qui se produisent naturellement dans le sol et dans les milieux aquatiques et les coliformes fécaux tels que Escherichia coli (-ve) dont la présence serait une indication de contamination fécale.

Citrate de test

Droite: Négatif

Gauche: Positif

test utlilization citrate est utilisé pour déterminer la capacité des bactéries à utiliser du citrate de sodium comme unique source de carbone et inorganique (NH4H2PO4) est la seule source d’azote fixé.

Lorsqu’un acide organique tel que le citrate de (Rappelez-vous du cycle de Krebs) est utilisé comme source de carbone et d’énergie, les carbonates et bicarbonates alcalins sont produits en fin de compte. En outre, l’hydroxyde d’ammonium est produit lorsque les sels d’ammonium dans le milieu sont utilisés en tant que seule source d’azote.

Utilisation de citrate exogène nécessite la présence de protéines de transport (citrate de permeases). Lors de l’absorption par la cellule, le citrate est clivée par la citrate lyase en oxaloacétate et de l’acétate. L’oxaloacétate est ensuite métabolisé en pyruvate et de CO2.

Citrate = oxaloacétate + acétate

oxaloacétate = pyruvate + CO2

Citrate de test d’utilisation

En outre la dégradation métabolique est dépendant du pH du milieu .

test d’utilisation du citrate (Source de l’image: Microbelibrary)

A: Négatif

B: Positif

Procédure de test d’utilisation du citrate:

  1. Inoculer Simmons Citrate Agar légèrement sur la pente en touchant la pointe d’une aiguille à une colonie qui est âgé de 18 à 24 heures.
  2. Incuber à 35 ° C à 37 ° C pendant 18 à 24 heures. Certains organismes peuvent nécessiter jusqu’à 7 jours d’incubation, en raison de leur taux limité de croissance sur un milieu de citrate.
  3. Observer le développement de la couleur bleue; dénotant alcalinisation.

Résultats attendus test d’utilisation du citrate:

positif Citrate:  la croissance sera visible sur la surface inclinée et le milieu sera un bleu de Prusse intense. Les carbonates alcalins et les bicarbonates produits comme sous-produits du catabolisme du citrate élever le pH du milieu à 7,6 au-dessus, ce qui provoque le bleu de bromothymol pour passer de la couleur verte d’origine au bleu.

négatif Citrate:  trace ou pas de croissance sera visible. Aucun changement de couleur se produira; le moyen restera la forêt de couleur vert foncé de l’agar non ensemencé. Seules les bactéries qui peuvent utiliser le citrate comme seule source de carbone et d’énergie seront en mesure de se développer sur le milieu de citrate Simmons, donc une culture d’essai citrate négatif sera pratiquement impossible de distinguer une pente non ensemencé

Contrôle de la qualité souches utilisées dans le test d’utilisation du citrate

  • Positif: Klebsiella pneumoniae
  • Négatif: Escherichia coli

 Liste des bactéries qui donne test positif de l’utilisation du citrate

  1. Klebsiella pneumoniae
  2. espèces Enterobacter (minorité de souches donne un résultat négatif)
  3. Citrobacter freundii
  4. Salmonella autre que Typhi et Paratyphi A
  5. Serratia marcescens
  6. Proteus mirabilis (minorité de souches donne un résultat négatif)
  7. Providencia

Variable Test Citrate (souches différentes donnent des résultats différents)

  1. Proteus vulgaris
  2. Vibrio cholerae
  3. Vibrio parahaemolyticus

Négatif de test Citrate

  1. Escherichia coli
  2. shigella spp
  3. Salmonella Typhi
  4. Salmonella Paratyphi A
  5. Morganella morganii
  6. Yersinia enterocolitica

Bien que rares, naturelles coli variantes E. qui sont citrate positifs ont été isolés. souches Citrate-négatives de E. aerogenes ont également été trouvés.

Utilisations de Citrate Utilisation d’essai

test d’utilisation du citrate fait souvent partie d’une batterie de tests utilisés pour identifier les agents pathogènes à Gram négatif de la famille des entérobactéries et isolats environnementaux. Par exemple, des kits de test telles que l’API 20E et II comprennent Enterotube milieu d’utilisation du citrate comme l’un des tests de diagnostic.

test d’utilisation du citrate est couramment employé dans le cadre d’un groupe de tests, le IMViC (indole, le rouge de méthyle, VP et Citrate) tests, qui distinguent entre les membres de la famille des entérobactéries en fonction de leur sous-produits métaboliques. utilisation du citrate peut être utilisé pour établir une distinction entre les coliformes tels que Enterobacter aerogenes (+ ve) qui se produisent.

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